ИФА анализаторы - современные возможности

Большинство современных ИФА-анализаторов снабжены достаточно мощным программным обеспечением, позволяющим решать любые задачи. Однако, в виду недостаточной информированности врачей-лаборантов эти возможности используются не в полной мере.

Современные ИФА анализаторы обладают набором программ расчета (на примере иммуноферментного анализатора ИФА Stat Fax 2100 и Stat Fax 3200), включает следующие вычислительные режимы (все режимы приведены в порядке уменьшения частоты использования в клинической лабораторной диагностике).

Режим прямого измерения оптического поглощения (absorbance mode). В этом режиме прибор не проводит никаких расчетов, только выдает на печать результаты оптической плотности исследуемых проб. При использовании данного режима врач-лаборант будет вынужден проводить дальнейшие вычисления и построение калибровочных кривых самостоятельно.

Режим измерения оптической плотности критической (cut-off mode). Этот режим ИФА анализаторы в основном используют для диагностики инфекционных агентов по наличию специфических антител или антигенов. В данном случае концентрация вещества не вычисляется. Это в основном качественный тест. Результат интерпретируется как отрицательный или положительный в зависимости от оптического поглощения пробы. В отечественных ИФА анализаторах понятие cut-off заменено на понятие оптическая плотность критическая (ОПкрит). Наиболее широко используется прямой CUT-OFF-режим - когда пробам с оптической плотностью выше величины CUT-OFF приписывается положительный результат, а пробам ниже CUT-OFF – отрицательный. Инверсный CUT-OFF-режим отличается от прямого тем, что положительный результат соответствует низкой оптической плотности пробы, а отрицательный – высокой.

Кроме того, современные ИФА-анализаторы можно запрограммировать для выявления образцов, попадающих в зону неопределённых результатов (“серая зона”), т.е. имеющих оптическую плотность в пределах 90-110% ОПкрит.

Режимы многоточечной калибровки ИФА. Режимы в этой группе различаются по виду калибровочной кривой, получаемой на основе калибровочных точек. Выбор режима обработки результатов диктуется производителями ИФА тест-системы, т.к. основан на результатах многократных испытаний. Производители ИФА тест-систем предлагают готовые растворы калибраторов с разной концентрацией искомого вещества в количестве от 2 до 7. Значения концентраций для стандартных растворов указаны в инструкции к набору и должны быть введены в память ИФА-анализатора. Прибору указывается в какие лунки планшета будут добавляться стандартные растворы и. зная этот прибор, рассчитывает концентрацию исследуемого вещества в проверяемых пробах.Редактирование осуществляется путем удаления одного образца из любой пары дублей. Таким образом, можно исключить по одной лунке из всех пар. Данные режимы используются в основном для расчета концентрации исследуемого вещества (гормоны, онкомаркеры и т.д).

К режимам многоточечной калибровки ИФА анализаторов относятся следующие режимы:

Режим с линейно–ломаной калибровочной характеристикой (Point to Point Mode). Другое название данного режима – кусочно-линейный. Основной режим для определения концентрации исследуемого вещества по стандартным растворам с известной концентрацией искомого вещества. Методика используемого расчёта ИФА анализа базируется на кусочно-линейной аппроксимации, т.е. приближенном выражении сложной функции с помощью более простых. Кусочно-линейная аппроксимирующая функция представляет в графическом виде переходящие друг в друга линейные участки, соединяющие значения оптической плотности стандартных растворов с разной концентрацией (растворы a, b, c, d, e).

Режим с оптимальной линейной аппроксимацией калибровочной характеристики (regression mode). В данном случае для расчета ИФА анализаторы используют метод регрессионного анализа, когда ИФА прибор выводит уравнение регрессии, с помощью которого находится величина случайной переменной (концентрация вещества в исследуемом образце), если величины других переменных (концентрации стандартных растворов a,b,c,d,e) известны. Калибровочная характеристика ИФА анализа в некотором масштабе координат является прямой линией или линией тренда

Режим расчета процента абсорбции (%ABS). Это, по сути, тот же ИФА режим с линейно-ломаной калибровочной характеристикой (Point to Point Mode), с выражением результата как в форме концентрации, так и в виде процентного отношения абсорбции пробы к абсорбции наиболее концентрированного калибратора (% absorbance multi-point mode).

Режим одноточечной калибровки по одному стандарту (single standard mode). Используется для расчета содержания искомого вещества. Концентрация вычисляется в соответствии с законом Ламберта-Бера по калибровочной характеристике, построенной по одному калибратору. Применение холостой пробы, помещенной в первую лунку первого стрипа, в этом случае обязательно.